Evaluation of Selected microRNA Expression Profiles in Bortezomib-Resistant Multiple Myeloma Cells

Amaç: Bortezomib, multipl miyelom tedavisinde yaygın olarak kullanılan önemli bir proteazom inhibitörüdür; ancak kazanılmış direnç, ilacın uzun dönem klinik etkinliğini sınırlandırmaktadır. MikroRNA’lar apoptoz, stres yanıtı, hücresel adaptasyon ve ilaç direnci süreçlerinde rol oynayan önemli post-transkripsiyonel düzenleyicilerdir. Bu çalışmada, multipl miyelom hücre modellerinde bortezomib direnci ile ilişkili olabilecek seçilmiş mikroRNA’ların ekspresyon profillerinin araştırılması amaçlandı.Yöntem: Bortezomib dirençli U266 ve RPMI-8226 multipl miyelom hücreleri, artan konsantrasyonlarda bortezomibe sürekli maruz bırakılarak oluşturuldu. Dirençli ve kontrol hücrelerinde miR-25, miR-30c, miR-34a, miR-34c, miR-200b, miR-200c, miR-326, miR-429, miR-449a, miR-449b, miR-499a, miR-582 ve miR-708 ekspresyon düzeyleri kantitatif gerçek zamanlı PCR yöntemi ile analiz edildi. Endojen kontrol olarak U6 snRNA kullanıldı ve relatif ekspresyon düzeyleri 2⁻ΔΔCt yöntemi ile hesaplandı.Bulgular: Bortezomib dirençli U266 ve RPMI-8226 hücrelerinde hem ortak hem de hücre hattına özgü mikroRNA ekspresyon değişiklikleri gözlendi. miR-34a, miR-34c, miR-326, miR-429, miR-449a ve miR-449b her iki dirençli hücre hattında da anlamlı olarak yüksek eksprese edildi. miR-25, miR-200c ve miR-708 ekspresyonları yalnızca dirençli RPMI-8226 hücrelerinde arttı. Buna karşılık, miR-200b, miR-499a ve miR-582 iki dirençli model arasında zıt ekspresyon paternleri sergilerken, miR-30c ekspresyonunda değişiklik saptanmadı.Sonuç: Multipl miyelomda kazanılmış bortezomib direnci, hem ortak hem de hücre hattına özgü mikroRNA değişiklikleri ile ilişkilidir. miR-34, miR-326 ve miR-449 aile üyelerinin her iki dirençli hücre hattında tutarlı şekilde artmış olması, bu mikroRNA’ların proteazom inhibisyonuna karşı gelişen adaptif yanıtlarda rol oynayabileceğini düşündürmektedir. Diğer mikroRNA’larda gözlenen farklı ekspresyon paternleri ise direnç mekanizmalarının heterojen yapısına işaret etmektedir. Bu mikroRNA’ların bortezomib direncindeki fonksiyonel rollerinin aydınlatılması için ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.