Study on the mechanism of <italic>Wujiajian Zhengqi Powder </italic>（五加减正气散） in inhibiting rotavirus replication by regulating the PI3K/AKT/mTOR autophagy pathway

<sec> <title>目的</title> 探讨五加减正气散对轮状病毒感染的Caco-2细胞中PI3K/AKT/mTOR通路的调控作用，并研究对染毒细胞自噬的影响。 </sec> <sec> <title>方法</title> 首先确定RV感染与细胞自噬之间的关系，利用自噬流试剂盒以及透射电镜技术探究轮状病毒（rotavirus，RV）感染以后Caco-2细胞的自噬情况，同时，qRT-PCR技术研究RV基因组VP7、NSP3的表达情况以研究细胞自噬与RV复制之间的关系。制备含药血清，再次利用自噬流和透射电镜技术观测加入五加减正气散含药血清Caco-2细胞的自噬水平，观测PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白和mRNA的水平以及ATG5、ATG12mRNA。 </sec> <sec> <title>结果</title> 在RV感染的初期Caco-2细胞的自噬逐渐增强，在6h时自噬水平开始下降；加入3-甲基腺嘌呤（3-MA）以后RV基因组的NSP3和VP7水平显著降低（<italic>P</italic>&lt;0.01）；与空白对照组相比，RV组的PI3K、p-AKT、p-mTOR的蛋白和相关mRNA水平显著抑制（<italic>P</italic>&lt;0.01）；五加减正气散含药血清进行干预后，各剂量组的自噬程度均显著弱于RV组；与RV组比较，RV+H组、RV+M组、RV+L组的ATG5、ATG12 mRNA的表达水平显著降低，PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达以及PI3K、AKT、mTOR mRNA水平显著下降（<italic>P</italic>&lt;0.01）。 </sec> <sec> <title>结论</title> 五加减正气散通过调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制RV的复制，同时这种抑制作用可能与干预了染毒细胞的自噬进程有关。 </sec>