Study on the mechanism of <italic>Diwu Yanggan Capsule</italic> （地五养肝胶囊） in inhibiting exosomes derived from hepatocellular carcinoma cells HCCLM3-induced malignant transformation of bone marrow mesenchymal stem cells

<sec> <title>目的</title> 研究地五养肝胶囊抑制人肝癌细胞HCCLM3来源外泌体（HCCLM3-Exo）诱导的人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells，hMSC）恶性转化的作用及机制。 </sec> <sec> <title>方法</title> 提取HCCLM3-Exo并采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和Western blot进行鉴定。将hMSC分为对照组、Exo组和地五养肝胶囊干预组（DWYG）。Exo组给予10µg HCCLM3-Exo处理，地五养肝胶囊干预组给予10µg/mL HCCLM3-Exo+10%地五养肝胶囊含药血清，对照组给予PBS。采用CCK-8技术、流式细胞术、Transwell侵袭实验检测细胞的增殖、凋亡、侵袭能力。并采用免疫荧光技术检测肝癌干细胞标志物，进一步通过分子生物学技术研究HCCLM3-Exo影响骨髓干细胞恶性转化的机制及地五养肝胶囊对这一过程的影响。 </sec> <sec> <title>结果</title> 提取的HCCLM3-Exo表达外泌体标志蛋白CD63和TSG101。HCCLM3-Exo能够促进hMSC细胞的增殖和侵袭、抑制其凋亡，且肝癌干细胞标志物CD133和EpCAM表达高于对照组。与对照组比较，Exo组细胞中Wnt1、β-catenin、cyclin D1、c-Myc蛋白和mRNA表达水平明显升高（<italic>P</italic>&lt;0.05）。而给予地五养肝胶囊含药血清干预后，细胞的增殖和侵袭能力下降，凋亡率升高，CD133和EpCAM的表达降低，Wnt1、β-catenin、cyclin D1、c-Myc蛋白和mRNA表达水平降低（<italic>P</italic>&lt;0.05）。 </sec> <sec> <title>结论</title> HCCLM3-Exo能促进hMSC增殖和侵袭、抑制其凋亡，或促进其进一步恶性转化，地五养肝胶囊可在一定程度上抑制HCCLM3-Exo诱导的hMSC的增殖和侵袭、促进其凋亡，并抑制其恶性转化，其机制可能与地五养肝胶囊通过影响肝癌肝再生微环境（包括外泌体）调控Wnt/β-catenin信号通路的作用有关。 </sec>