Caractérisation d'une lignée cellulaire de cancer de l'ovaire A2780 résistante à l'auranofine

L'augmentation des espèces réactives de l'oxygène (ROS, de l’anglais Reactive Oxygen Species) et le stress oxydatif sont des caractéristiques du cancer. Les ROS jouent un rôle crucial dans la progression du cancer en participant à la signalisation de la prolifération, différenciation et migration cellulaires. Simultanément, leurs niveaux sont régulés par des mécanismes antioxydants pour prévenir une oxydation excessive des biomolécules et la mort cellulaire. L'auranofine (AF), un médicament à base d'or, est un composé redox-actif ciblant l'enzyme thioredoxine réductase (TRXR), un régulateur clé du système thioredoxine, qui, avec le glutathion (GSH), maintient l'homéostasie redox cellulaire. Initialement approuvée pour la polyarthrite rhumatoïde, l'AF est explorée pour le traitement d'autres maladies, y compris le cancer. AF est un candidat prometteur contre le cancer de l'ovaire, dépendant du facteur nucléaire NRF2, un régulateur de gènes antioxydants, y compris TRXR. Les effets de l'AF sur la lignée A2780 du cancer de l'ovaire montrent que l'AF, par l'inhibition de TRXR, induit une suractivation de NRF2 et la surexpression des protéines cibles. De plus, une étude redox a révélé une oxydation accrue des cystéines dans les protéines du réticulum endoplasmique (ER) et de l'espace intermembranaire (IMS). Dans ce contexte, nous avons établi une lignée A2780 résistante à l'AF avec une IC50 cinq fois plus élevée que la lignée sensible pour explorer les mécanismes de l'activité redox de l'AF. Une approche protéomique comparative a été utilisée pour caractériser les deux lignées cellulaires à l'état basal et après traitement par AF (0,7 µM). À l'état basal, la lignée résistante présente une expression accrue de protéines impliquées dans la morphogenèse neuronale et le métabolisme des lipides. Après traitement, des différences significatives ont été observées dans le métabolisme du GSH et de l'acide rétinoïque (RA). CHAC1, une enzyme responsable de la dégradation du GSH, est surexprimée exclusivement dans les cellules sensibles. Les mesures de GSH ont montré une augmentation significative après 24h, mais une diminution plus rapide après 48h et 72h dans les cellules sensibles par rapport aux résistantes. L'approche transcriptomique a révélé que l'AF induit une activation de l'UPR dans les cellules sensibles, non observée dans les cellules résistantes. L'induction de CHAC1 est un effet en aval de la réponse UPR-PERK-ATF4 et contribue à la mort cellulaire par épuisement du GSH. L'augmentation de la concentration d'AF dans les cellules résistantes induit également CHAC1. Concernant le métabolisme du RA, nous avons observé une sous-régulation des transporteurs CRABP1 et CRABP2, ce dernier transportant le RA vers le noyau pour se lier à RARα, médiant la transcription de gènes liés à la prolifération cellulaire. Un test de viabilité cellulaire, utilisant l'AF à la CI50 respective, combiné avec une concentration non cytotoxique de RA ou un agoniste de RARα (BMS753), a montré que le traitement AF/RA réduisait la viabilité dans les cellules sensibles mais pas résistantes, tandis que le traitement AF/BMS753 augmentait la mort cellulaire dans les deux lignées. Nous suggérons que BMS753 contourne CRABP2, médiant la transcription des gènes cibles de RARα impliqués dans l'arrêt du cycle cellulaire, induisant ainsi la mort cellulaire avec AF. Conformément à nos résultats, CRABP2 pourrait être une cible intéressante face à l'augmentation de la résistance.