Study of the antifungal effect of the antimicrobial peptide ETD151 on Aspergillus fumigatus

La colonisation bronchique par Aspergillus fumigatus (Af) constitue une source majeure de complications infectieuses chez les patients atteints de maladies pulmonaires chroniques. L'efficacité limitée des antifongiques disponibles, associée à l'émergence croissante de souches résistantes aux azolés, rend nécessaire l'exploration de nouvelles stratégies thérapeutiques. Dans ce contexte, les peptides antimicrobiens (PAM) constituent une alternative prometteuse. Le peptide modifié ETD151, dérivé d'un PAM de lépidoptère, a notamment démontré une activité antifongique contre Botrytis cinerea, un champignon phytopathogène. L'objectif de cette thèse était d'évaluer l'effet anti-Aspergillus d'ETD151 ainsi que son éventuel rôle sur la réponse inflammatoire des cellules épithéliales bronchiques primaires humaines (CEBPH). Le peptide a été testé sur des souches sensibles et résistantes aux azolés, avec des résultats probants. ETD151 induit un raccourcissement et une hyper-ramification des filaments fongiques. Un test cinétique à la résazurine a révélé une inhibition significative de l'activité métabolique, atteignant un maximum avec 1,25 µM d'ETD151. L'activité lytique du peptide a été confirmée par des colorations au calcofluor et au Sytox Green. Des essais de compétition, ainsi que l'utilisation d'une souche de Af délétée pour un gène codant les glucosylcéramides, ont permis de confirmer que ces lipides membranaires sont la cible de ETD151. Par ailleurs, des repiquages successifs sur 16 génération du champignon en présence de ETD151 n'ont pas permis de mettre en évidence le développement de résistance du champignon vis avis du peptide. Enfin, le peptide ne provoque ni libération d'IL-8 par les CEBPH, ni cytotoxicité. Enfin, son effet antifongique sur les CEBPH infectées par Af a été confirmé par dénombrement des CFU et observation en microscopie confocale. Ces résultats soulignent le potentiel des PAM comme agents antifongiques innovants, notamment face aux souches résistantes aux traitements conventionnels.