ANÁLISE DOS EFEITOS DO LÁTEX LIOFIIZADO DE EUPHORBIAUMBELLATA SOBRE A APOPTOSE E NA MORTE CELULAR EM CÉLULAS MONONUCLEARES E EM LINHAGENS CELULARES DE NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS

As neoplasias hematológicas afetam células do sangue, medula óssea e/ou sistema linfático e, atualmente são alvos da busca por terapias mais seletivas.A Euphorbia umbellata ( E. umbellata ), conhecida como Janaúba, é amplamente utilizada na medicina popular para o tratamento de diversas doenças. O látex da planta possui compostos bioativos com propriedades citotóxicas e imunomoduladoras. Avaliar o índice de citotoxicidade (IC₅₀) do látex liofilizado (LL) de E. umbellata por meio do teste do vermelho neutro, e avaliações de apoptose e morte celular por citometria de fluxo em linhagens de leucemia linfoide aguda (Jurkat), leucemia mieloide crônica (K-562), linfoma de Burkitt (RAJI) e células mononucleares de sangue periférico (PBMCs). Foram utilizadas células imortalizadas Jurkat, K-562 e Raji e PBMCs, isoladas por gradiente de densidade com Ficoll-Paque™. O IC₅₀ foi determinado pelo teste do vermelho neutro e calculado por regressão não linear, sendo: 8,8 mg/mL para Raji (R = 0,93), 8,6 mg/mL K562 (R = 0,96), 5,4 mg/mL para PBMCs (R = 0,90) e 4,6 mg/mL para Jurkat (R = 0,74). A concentração utilizada para os ensaios de morte celular foi de 5 mg/mL por ser inferior ao IC₅₀ das PBMCs. Foram semeadas 1 × 10⁵ células/poço controle e tratadas por 24 horas. Os percentuais de apoptose e morte celular foram avaliados por citometria de fluxo por meio das marcações com iodeto de propídio para morte celular e Anexina V para apoptose. A significância estatística foi de p < 0,05. Na análise da apoptose com Anexina V as células Jurkat (p = 0,01) e Raji (p = 0,04) apresentaram umaumento estatisticamente significativo desse processo em comparação ao grupo controle. Em contrapartida, PBMCs(p = 0,06) e K-562 (p = 0,63) não apresentaram diferenças. Na avaliação de morte celular com iodeto de propídio, RAJI tratada apresentou aumento significativo (p = 0,001), enquanto as demais linhagens Jurkat (p = 0,33) e K-562 (p = 0,33) e PBMCs (p = 0,11) não apresentaram alterações significativas. O tratamento com o LL de E. umbellata demonstrou atividade citotóxica variável entre as linhagens testadas. Jurkat e RAJI foram mais sensíveis à indução de apoptose. Somente Raji teve maior percentual de morte celular nas análises feitas com iodeto de propídio, enquanto K-562 e PBMCs apresentaram maior resistência a ambos os processos. A efetividade do tratamento nas células K-562 e RAJI pode ter sido limitada em virtude dos seus valores de IC₅₀ serem superiores ao das PBMCs. Os achados também sugerem que o LL de E. umbellata tem potencial para atuar na apoptose e na morte celular das células avaliadas, mas a dosagem deve ser melhor investigada, uma vez que o objetivo principal é a morte das células tumorais e não das PBMCs. O comportamento de cada uma das linhagens e das células controle também pode ser o responsável pelos resultados distintos encontrados. Novos estudos com diferentes concentrações, incluindo valores inferiores ao utilizado, para melhor caracterizar o perfil dose-resposta envolvidos na indução de morte celular pelo extrato de E. umbellata são necessários. Conclusão: Este estudo piloto demonstrou que o LL de E. umbellata apresenta atividade citotóxica diferente em cada uma das linhagens deneoplasias hematológicas e nas PBMCs, com efeitos mais pronunciados em Raji e Jurkat. A resposta distinta entre as linhagens sugere que a sensibilidade ao LL pode estar relacionada ao comportamento distinto de cada uma das células estudadas, tanto nas PBMCs quanto nas neoplasias avaliadas. FAPEMIG.