IDENTIfiCAÇÃO DE SUBGRUPOS ABO COM FRACA EXPRESSÃO ANTIGÊNICA: IMPLICAÇÕES PARA A TIPAGEM SANGUÍNEA E SEGURANÇA TRANSFUSIONAL

Variações genéticas dão origem a subgrupos de ABO os quais apresentam alteração na expressão dos antígenos, tanto com redução de expressão como com expressão alterada que leva a produção de anticorpo, apesar da presença do antígeno. A definição dos subgrupos ABO é difícil devido à complexidade genética e à necessidade de ferramentas sorológicas e moleculares adicionais, o que torna escasso o conhecimento destes subgrupos. Apesar de um paciente com subgrupo ABO ser seguramente transfundido com hemácias do tipo O, a presença de subgrupo não identificado em doadores de sangue pode ter consequências importantes na segurança transfusional. Sendo assim, este projeto tem como objetivo definir os subgrupos responsáveis por alterações sorológicas que levam a falha na tipagem. Foram selecionadas quatro amostras de doadores de sangue que apresentaram discrepância na tipagem ABO entre as doações em microplaca no equipamento automatizado Neo ou entre diferentes metodologias. Foi realizado estudo sorológico em gel teste, tubo, tratamento com bromelina e adsorção/eluição. Foi realizada extração de DNA e sequenciamento das regiões codificadoras do gene ABO. Das 4 amostras, 3 apresentavam o genótipo ABO*AW.09/ABO*B.01. Dentre elas, 2 apresentaram resultado negativo na tipagem direta com anti-A1 e positivo 4+ com anti-B e na tipagem reversa foi detectada a presença de anti-A1 (3+). Ambas foram tipadas na doação atual como B, porém uma delas apresentou resultado anterior AB e a outra apresentou fraca reatividade com anti-A1 na retipagem da bolsa. A terceira doação genotipada como ABO*AW.09/ABO*B.01 apresentou resultado interrogado na tipagem direta com anti-A1 na doação atual e na doação anterior foi tipado como B. As 3 amostras apresentaram resultado semelhante, com reatividade em gel e em tubo de weak a 2+. A quarta amostra foi tipada como B na doação anterior e na doação atual apresentou reatividade indeterminada apenas com o anti-AB e presença de anti-A1. Foi genotipada como ABO*AW.31/ABO*B.01 e a presença do antígeno só foi detectada com tratamento com bromelase e em teste de adsorção/eluição. A última amostra foi tipada como O na doação anterior, e na doação atual foi observada discrepância entre direta e reversa (ausência de reatividade em ambas as provas). Através da genotipagem foi identificado o fenótipo Ael, gerado pelo genótipo ABO*AEL.01/ABO*O.01.02. Os resultados demonstram a presença do subgrupo Ax causado pelo alelo ABO*AW.09, o qual não foi detectado ou foi fracamente detectado pelo nosso método de triagem de doador, podendo estar envolvido em uma classificação errada da tipagem ABO. Apesar da reduzida expressão do antígeno, esta variante pode ser detectada por outras metodologias, o que demonstra uma limitação do teste que aplicamos atualmente, que deve ser um ponto de atenção e aprimoramento. Os outros subgrupos classicamente apresentam fraca expressão, não sendo detectados pelas metodologias convencionais. Estudos para compreender a frequências destes subgrupos na nossa população são de grande importância para predizer o impacto destes na segurança transfusional.