EFEITO CITOESTÁTICO DO LÁTEX DE EUPHORBIA UMBELLATA NA LINHAGEM DE LEUCEMIA MIELOIDE CRÔNICA K562

A Leucemia Mieloide Crônica (LMC) é uma neoplasia mieloproliferativa clonal e rara, de evolução lenta e progressiva, caracterizada pela produção excessiva de leucócitos anormais. A utilização empírica de plantas popularmente conhecidas como fitoterápicos antitumorais, como o látex de Euphorbia umbellata , tem atraído a atenção para os estudos dessa planta que demonstrem esse potencial tumoricida. Diante disso, pesquisas na área básica que investiguem os mecanismos de ação do látex e sua possível interferência nas fases do ciclo celular de linhagens de neoplasias hematológicas apresentam importância científica por possibilitarem o desenvolvimento futuro de estudos clínicos e translacionais acerca do tema. Compreender a atuação do látex de Euphorbia umbellata sobre as fases G1, S e G2 do ciclo celular da linhagem K562 de Leucemia Mieloide Crônica, a fim de avaliar se há efeito citostático. As células K562 foram semeadas em placas de cultura (1 x 10 5 células/poço) e tratadas com as concentrações de 10 μg/mL, 100 μg/mL, 1000 μg/mL e 10000 μg/mL do látex liofilizado de Euphorbia umbellata em triplicatas. Foram mantidas em incubadora úmida a 5% de CO₂ em meio RPMI com 10% de soro fetal bovino, penicilina e estreptomicina por 24 horas. Após esse período, foi realizada a marcação com 7-AAD e aquisição no citômetro de fluxo BD FACS Canto II™. Foi realizada a aquisição e análise de 10.000 eventos pelo software Diva 6.0 (BD Biosciences). Ao final, avaliou-se o ciclo celular pelo programa FlowJo™10, com obtenção dos percentuais de células nas fases G1, S e G2. Houve um menor percentual de células na fase G1 nos grupos tratados com látex de Euphorbia umbellata em comparação às células não tratadas e essas diferenças foram significativas (NTx10 p = 0,0072; NTx1000 p = 0,0072; NTx10000 p = 0,0281). A fase S apresentou uma maior quantidade de células nos grupos tratados em comparação aos não tratados (NTx10 p = 0,0212; NTx1000 p = 0,0146). Já na fase G2, não foram observadas diferenças estatísticas entre as amostras tratadas e não tratadas (NTx10 p = 0,9910; NTx100 p = 0,9982; NTx1000 p = 0,9663; NTx10000 p = 0,9937). A adição do látex parece ter reduzido o percentual de células tratadas na fase G1. Já na fase S, o percentual de células tratadas foi maior quando comparado ao controle. Na fase G2, não houve grandes alterações entre os percentuais de células controle e tratadas. Percebe-se, como possível resultado do tratamento, uma interferência nas fases iniciais do ciclo, com estímulo de células em repouso a progredirem até o momento S, de síntese, mas interrupção do ciclo nesse momento, visto que não foi encontrada diferença populacional significativa na fase G2, final do ciclo. O látex de Euphorbia umbellata parece ter um efeito citostático na fase S do ciclo celular das células K562. A alta porcentagem de células nessa fase indica possível parada do ciclo sem indução de apoptose. Novos ensaios são necessários para entender os mecanismos que induzem o bloqueio celular a partir da utilização desse fitoterápico.