DEVELOPMENT OF AN ENZYME IMMUNOASSAY FOR THE DIAGNOSIS OF EPIZOOTIC EQUINE LYMPHANGOITIS

During the last two years, foci of epizootic equine lymphangoiditis (ELL) have been detected on the territory of Bukhar-Zhyrau district of Karaganda region of the Republic of Kazakhstan. To date, villagers in this region have lost more than 300 animals. The veterinary services of Karaganda Oblast have imposed a quarantine in the Umutker rural district since February 2025, and it remains in effect. Over the last six months, 125 sick horses were seized and destroyed in the rural district. At present, diagnostic and prophylactic preparations for diagnosis and vaccination against EBL are not produced in the territory of the Republic. In this regard, scientists of ‘RIBSP’ LLP within the framework of the scientific programme ‘Improvement of measures to ensure biological safety in Kazakhstan: counteraction to dangerous and especially dangerous infections’ developed a method of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect the antigen of epizootic lymphangoitis. For this purpose, specific immunoglobulin, normal and specific antigens, conjugates were used in the experiment, their working doses for ELISA staging were determined, temperature and time regimes and salt solutions for interaction of diagnostic preparations were also selected. Using the above-mentioned diagnostic preparations, the optimal conditions for ELISA method for detection of the antigen of this fungus in various materials were worked out. The developed method was tested for specificity and sensitivity. Homogeneous and heterogeneous samples were used for this purpose. It was experimentally established that the developed method is suitable for the diagnosis of EEL. В течение последних двух лет очаги эпизоотического лимфангоита лошадей (ЭЛЛ) выявляются на территории Бухар-Жырауского района Карагандинской области Республики Казахстан. На сегодняшний день сельчане данного региона потеряли более 300 голов. Ветеринарными службами Карагандинской области в Умуткерском сельском округе введён карантин с февраля 2025 года и действует до сих пор. За последнее полгода в сельском округе изъято и уничтожено 125 голов больных лошадей. В настоящее время на территории республики не производятся диагностические и профилактические препараты для постановки диагноза и вакцинации против ЭЛЛ. В связи с этим учеными ТОО «НИИПББ» в рамках научной программы «Совершенствование мер обеспечения биологической безопасности в Казахстане: противодействие опасным и особо опасным инфекциям» был разработан метод иммуноферментного анализа (ИФА) для выявления антигена эпизоотического лимфангоита. Для этого в опыте использованы специфический иммуноглобулин, антигены нормальные и специфические, конъюгаты, определены их рабочие дозы для постановки ИФА, также подобраны температурно-временные режимы и солевые растворы для взаимодействия диагностических препаратов. С использованием вышеуказанных диагностических препаратов были отработаны оптимальные условия для постановки метода ИФА для выявления антигена данного гриба в различных материалах. Разработанный метод испытан на специфичность и чувствительность. Для этого использованы гомогенные и гетерогенные пробы. Опытным путем установлено, что разработанный метод пригоден для диагностики ЭЛЛ.