Exploring the effect of Shenggu Zaizao Pill on the pyroptosis level of BMSCs through regulating NLRP3 transport based on HDAC6

<sec> <title>目的</title> 从组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）转运的角度，探讨生骨再造丸对骨髓间充质干细胞（BMSCs）焦亡水平的影响。 </sec> <sec> <title>方法</title> 购买原代兔BMSCs，制备焦亡BMSCs模型，采用HDAC6激动剂（Theophylline）与抑制剂（Trichostain A）对焦亡的BMSCs进行干预；制备生骨再造丸含药血清，对焦亡的BMSCs进行干预。将上述细胞分为空白组、模型组、模型组+HDAC6激动剂组（模型组+ Theophylline）、模型组+ HDAC6抑制剂组（模型组+ Trichostain A）、模型组+生骨再造丸含药血清组。采用CCK-8法检测BMSCs活力及含药血清对BMSCs的最佳干预时间；采用PCR法检测各组BMSCs中膜孔蛋白D（GSDMD）的基因水平；采用WB法检测各组BMSCs中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、GSDMD、NLRP3蛋白表达；采用ELISA法检测各组BMSCs中HDAC6、 白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素18（IL-18）含量。 </sec> <sec> <title>结果</title> 与空白组相比，模型组细胞GSDMD mRNA水平上升（<italic>P</italic>&lt;0.05），NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白水平显著升高（<italic>P</italic>&lt;0.05），HDAC6含量明显升高（<italic>P</italic>&lt;0.05），IL-18、IL-1β水平上升（<italic>P</italic>&lt;0.05）。与模型组相比，模型组+HDAC6激动剂组中细胞GSDMDmRNA水平上升（<italic>P</italic>&lt;0.05），NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白水平明显升高（<italic>P</italic>&lt;0.05），HDAC6含量明显升高（<italic>P</italic>&lt;0.05），IL-18、IL-1β水平上升（<italic>P</italic>&lt;0.05）；模型组+ HDAC6抑制剂组中细胞GSDMD mRNA水平下降（<italic>P</italic>&lt;0.05），NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白水平降低（<italic>P</italic>&lt;0.05），HDAC6含量降低（<italic>P</italic>&lt;0.05），IL-18、IL-1β水平降低（<italic>P</italic>&lt;0.05）；模型组+生骨再造丸含药血清组中细胞GSDMDmRNA水平明显下降（<italic>P</italic>&lt;0.05），NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白水平明显降低（<italic>P</italic>&lt;0.05），HDAC6含量明显降低（<italic>P</italic>&lt;0.05），IL-18、IL-1β水平明显降低（<italic>P</italic>&lt;0.05）。 </sec> <sec> <title>结论</title> 生骨再造丸通过抑制HDAC6的活性，抑制NLRP3炎症小体的激活，可以有效改善BMSCs焦亡水平。 </sec>