Investigating the application potential of TLR8a in disease-resistant breeding of Ctenopharyngodon idella via CRISPR/Cas9

草鱼出血病严重制约了淡水养殖业的可持续发展, 基于CRISPR/Cas9基因编辑技术筛选免疫负调控基因并培育抗病品系, 已成为当前病害防控的重要策略. 草鱼（Ctenopharyngodon idella）TLR8a是抗病毒免疫反应中的负调控因子, 为了确定该靶点在抗病育种中的应用潜力, 本研究构建了F0代tlr8a基因缺失的杂合体草鱼模型, 并探究其在抗病毒感染中的免疫调控机制. 结果表明, 敲除草鱼tlr8a可减缓出血病的临床症状与肝胰腺、肠道的病变程度, 并提高抗病毒关键基因(ifn1、mx2)与炎症基因(nf-κb2、il-6)的表达, 降低II型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-II)感染后病毒外衣壳蛋白VP56的mRNA表达量. 此外, 敲除tlr8a后草鱼的外周血白细胞展现出了更强的趋化活性, 并且活性氧的产生能力和酸性磷酸酶活性显著增强. 这暗示TLR8a可能通过调控干扰素通路与细胞因子来参与抗病毒先天免疫, 并介导过度的炎症激活. 本研究不但为解析鱼类TLR信号通路的免疫平衡机制提供了新视角, 也为抗病鱼类的分子选育提供了潜在靶点.