Characterization of Cellulase from Bacillus thuringiensis CS1 Isolated from Environmental Soil

대구광역시에서 채취한 삼림 토양 시료로부터 Cellulase 생산 균주를 단리하기 위해서 기질로서 CM-cellulose, 그리고 기질 염색시료로서 0.02% Trypan Blue를 첨가한 LB고체배지 상에서 명확한 활성환을 형성하는 Cellulase생산균주를 단리하였다. 단리한 균주 유래의 16s rRNA 유전자 분석을 통해 균주 동정을 진행한 결과, 본 균주는 Bacillus thuringiensis로 동정되었으며. 본 균주를 B. thuringiensis CS1으로 명명하였다. B. thuringiensis CS1은 37℃의 조건에서 150 rpm으로 진탕 배양 시, 균주 배양 24시간에서 가장 높은 Cellulase 생산성을 보였으며. 최적 pH 및 온도는 각각 pH 6.0과 60℃에서 최적의 효소 활성을 나타내었다. 온도 및 pH에 대한 효소 안정성 검토에서는 본 미생물 유래 Cellulase는 pH 4.0-8.0의 범위 및 50℃까지에서는 30분간의 효소처리에 의해서도 효소활성의 감소없이 안정한 특성을 보였다. 기질특이성 검토에서는 B. thuringiensis CS1 유래 Cellulase는 CM-cellulose에 대해서 가장 높은 효소활성을 보였다. 본 연구에서 단리한 균주 유래 Cellulase는 비결정Cellulose 기질인 CM-cellulose, Alkali swollen cellulose에서는 높은 효소활성을 나타내었지만, 결정Cellulose 기질인 Alpha-cellulose, Sigmacell cellulose 에 대해서는 CM-cellulose의 활성과 비교하여 각각 약 21%,와 10%의 상대적으로 낮은 효소활성을 나타내었다.